Variabilidade genética de isolados de Ceratocystis fimbriata
Diversidade genética, filogenia, marcadores microssatélites
No setor florestal o acometimento por pragas e doenças podem ocorrer principalmente via irrigação, tratos culturais, falta de cuidados fitossanitários com as ferramentas, material propagativo contaminado, e outros, dentre as doenças que ocorrem com mais frequência em teca, vale ressaltar a causada pelo gênero Ceratocystis que causa perca na produtividade e qualidade da madeira. Para a prevenção ou manejo de doenças em plantas, estudos quanto a variabilidade genética da população do agente causal torna-se de extrema importância, sendo assim o objetivo com esse trabalho foi investigar a diversidade genética de isolados de Ceratocystis fimbriata provenientes de teca, utilizando-se marcadores microssatélites. Foram obtidos 70 isolados do fungo a partir de coletas nos estados do MT e PA. O fungo foi cultivado em meio MYEA por cerca de 14 dias para posterior extração de DNA, esta foi realizada utilizando o kit Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega), produtos oriundos desta extração foram submetidos à etapa de PCR , onde para cada amostra utilizou-se aproximadamente 25 ng de DNA total (5 μL), 2,5 μL de tampão de PCR 10x, 0,75μL de MgCl2 a 50mM, 0,31μL de dNTP a 20 mM, 1,25U de taq polimerase, 2,5 μL de cada primer e 13,68 μL H2O ultrapura q.s.p. Posterior a PCR, foi realizada a eletroforese em gel de agarose 2,5%, para a produção das imagens dos géis para 14 locos de microssatélites. As imagens dos géis com os fragmentos de DNA, amplificados e separados, foram submetidas à verificação de pesos moleculares para obtenção dos dados sobre os alelos, e com estes e os parâmetros de diversidade genética e estrutura populacional foram elaborados. Foi possível separar os isolados em quatro grupos distintos, sendo o último contendo mais de 50% dos isolados.