Banca de DEFESA: LARISSA LEMES DOS SANTOS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LARISSA LEMES DOS SANTOS
DATA : 20/02/2024
HORA: 13:30
LOCAL: Alta Floresta, MT.
TÍTULO:

ESTABELECIMENTO DE PROTOCOLO DE EXTRAÇÃO DE DNA E ANÁLISE DA DIVERSIDADE GENÉTICA DE Mouriri guianensis AUBL.

 

PALAVRAS-CHAVES:

CTAB, Reação em Cadeia da Polimerase, Roncador, Variabilidade genética.

PÁGINAS: 77
RESUMO:

Pertencente à família Melastomataceae, Mouriri guianensis Aubl. conhecido popularmente como roncador, é uma frutífera consumida de forma in natura pela população e ictiofauna, possui propriedades medicinais para o tratamento de várias enfermidades, além de ser recomendada para apícolas por ter a abelha como principal polinizador, portanto, é de grande interesse para os pesquisadores devido ao seu potencial ecológico, econômico e medicinal. O objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo de extração de DNA para a espécie Mouriri guianensis e avaliar a diversidade e estrutura genética de populações naturais por meio de marcadores moleculares ISSR (Inter Simple Sequence Repeat). A amostragem do material foliar foi realizada em quatro populações com ocorrência natural no bioma Pantanal (Barão do Melgaço, Rio São Lourenço e Rio Jauru) e Amazônia (Rio Sepotuba). A extração de DNA foi baseada no método CTAB (Brometo de Cetiltrimetil Amônio) e os testes de amplificações do DNA extraído via PCR (Polymerase Chain Reaction). Para as análises de diversidade genética e estrutura populacional foram realizados testes de amplificações, e posteriormente, selecionados 8 (oito) primers. Os protocolos de extração de DNA do M. guianensis contendo as maiores concentrações de CTAB (5%), foram os mais eficientes, interferindo na qualidade e quantidade de DNA extraído e proporcionado um produto de maior integridade. A eficiência também foi determinada pelas reações de amplificação do DNA via PCR. Quanto a caracterização molecular, os 8 primers ISSR amplificaram um total de 127 fragmentos, dos quais 98% foram polimórficos. A AMOVA (Análise de Variância Molecular) revelou que a maior diversidade genética está entre as populações (52%), e os maiores índices de diversidade foram encontrados para a população Rio Jauru (H=0,28; I=0,41 e P%=71,65).  Para a matriz de dissimilaridade, a menor distância ocorreu entre os indivíduos 9 e 10 (0,15), ambos da população Rio Sepotuba, enquanto os indivíduos 5 (Rio Sepotuba) e 32 (Rio Jauru) (0,76) foram os mais distantes. O agrupamento pelo método UPGMA formou cinco grupos distintos, os indivíduos foram compostos conforme ao local de coleta, como por exemplo, os 14 indivíduos da população Rio Sepotuba alocaram o primeiro grupo. A análise bayesiana revelou a formação de dois grupos genéticos principais de acordo com os diferentes biomas, o UPGMA também formou grupos utilizando o mesmo critério, porém, dentro do bioma Pantanal teve uma subdivisão em locais de coleta. E a Análise de Coordenadas Principais, correspondeu com o agrupamento UPGMA e Bayesiano, destacando o isolamento da população do Rio Sepotuba (Amazônia). O protocolo de extração de DNA com CTAB 5% (com Proteinase K) possibilitou a amplificação via PCR das amostras. Os marcadores moleculares ISSR evidenciaram diversidade genética entre os indivíduos de Mouriri guianensis, e, revelou as primeiras evidências de uma estruturação populacional para a espécie entre o local de coletas e bioma de origem. A maior diversidade foi encontrada a nível interpopulacional, a população Pantaneira Rio Jauru apresentou a maior diversidade e a única população Amazônica (Rio Sepotuba) foi a mais isolada geneticamente. A espécie nativa da Amazônia e Pantanal Matogrossense apresenta potencialidade para garantir sua manutenção e efetiva conservação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 32143101 - ANA APARECIDA BANDINI ROSSI
Externo ao Programa - 70141009 - OSCAR MITSUO YAMASHITA
Externo à Instituição - 019.240.091-61 - ELIANE CRISTINA MORENO DE PEDRI -
Externo à Instituição - 607.835.671-20 - EULÁLIA SOLER SOBREIRA HOOGERHEIDE - EMBRAPA